[최종목표]
◎ Salmonella를 포함한 7종의 병원성 세균을 타겟으로 하는 동시/다중 검출용 REBA및 액상바이오칩의 개발
◎ 방류수내 유해미생물 오염도 모니터링을 위한 새로운 지표미생물의 제안
◎ 방류수의 미생물오염도 모니터링의 현장 매뉴얼 확립

[개발내용 및 결과]
◎ Salmonella를 포함한 7종 이상의 병원성 세균을 타겟으로 하는 동시/다중 검출용REBA 및 액상바이오칩의 개발
- REBA system 개발
방류수 내 유해미생물인 병원성 세균 중 7종을 증폭할 수 있는 PCR primer 및 7종에(E. coli, Shigella spp., Salmonella spp., Yersinia spp., Pseudomonas aeruginosa, Enterococcus faecalis, Mycobacterium spp.)해당하는 probe와 더불어 E. coli O157:H7, Citrobacter spp., Enterobacter spp., Klebsiella spp., Yersinia enterocolitica, Yersinia pseudotuberculosis, Listeria spp., gram negative, gram positive bacteria에 종 특이적으로 반응할 수 있는 probe와 16s rRNA를 가지는 모든 균종에 반응할 수 있는 probe도 제작하여 REBA system을 확립.
- 액상바이오칩의 개발
REBA system에서 확립한 7종의 미생물 검출용 probe로 액상바이오칩에 사용하는 미세구체 비드 제조 및 SOP 확립

◎ 방류수내 유해미생물 오염도 모니터링을 위한 새로운 지표미생물 제안
방류수 시료를 대상으로 고전적인 미생물학적 동정 방법과 상용화된 kit를 이용한 동정법의 실험결과, 대장균군 이외에 Pseudomonas spp., Yersinia spp.와 Enterococcus spp., Listeria spp., Staphylococcus spp. 등을 수질기준 지표세균으로 추가하여 사용할 가능성이 있을 것으로 사료.

◎ 분자생물학적 기법의 현장 매뉴얼확립
- 수 처리시설에서 방출되는 방류수 환경에서 병원성 세균을 신속하게 검출할 수 있는 분자생물학적 모니터링시스템 확립하여 3차년도에 걸쳐 가톨릭 대학교에서 제공받은 7지역의 방류수로 방류수에서 검출될 수 있는 대상세균에 대한 유용성을 평가함.
- 원주 환경친화기술센터의 수질검사센터와의 협력을 통해 3차년도에 걸쳐 확립한 분자생물학적 기법들인 REBA system과 액상바이오칩의 현장 적용을 시험하고 현장에서 사용가능한 매뉴얼을 확립.

[개발기술의 특징, 장점]
◎ 개발된 분자생물학적 기법들의 최적화 및 시제품 개발
- REBA system 최적화 및 시제품 개발
과제의 최종목표인 7가지 세균에 대한 probe를 적용한 REBA system에서 발광법으로 기존에 제품으로 출시되고 있는 strip으로 된 membrane을 이용한 발색법으로 시제품 "REBA Waterborne-ID？？" 개발
- 액상바이오칩의 최적화 및 시제품 개발
REBA system에서 사용하는 probe를 사용하여 마이크로스피어 비드에 결합시켜 Suspension Array을 제작하여 시제품 "수인성 미생물 검출 액상 바이오칩 prototype" 개발

 

 

[원문 파일첨부 참조]